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植物基因组DNA快速提取试剂盒图片
产品货号:
WH0024
中文名称:
植物基因组DNA快速提取试剂盒
英文名称:
Plant genomic DNA rapid extraction kit
产品规格:
50次|200次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,适合从各种新鲜或冻存植物材料中提取基因组DNA。无需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制,实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组DNA片段大,得率高,纯度好,质量稳定可靠。

产品特点:
·简单快速:试剂盒为溶液系统,可在1h内从各种植物组织中快速提取到高质量的基因组DNA。
·无毒害:无需酚/氯仿抽提,使用安全。
·材料起始量无限制:实验者可根据实验需求灵活调整样品的起始用量。
·性价比超高:质量好,价格大众化,非常适合样本量大的植物基因组提取。

下游应用:
· PCR、荧光定量PCR与多重PCR。
· RAPD、RFLP、AFLP、SSR等分子标记。
·文库构建、Southern杂交。

不同植物组织DNA提取得率:(样本量:100mg,OD260/OD280:1.7~1.9)
植物材料平均DNA产量
拟南芥3~5μg
小麦25~32μg
松树25~32μg
马铃薯5~7μg
番茄12~16μg
油菜2~5μg
烟草20~30μg
水稻12~30μg
大豆20~32μg
玉米20~32μg

不同来源的植物材料中基因组会有差异,以上所有材料均为新鲜幼嫩叶片。

提取实例:
植物基因组DNA快速提取试剂盒提取实例
本试剂盒提取的各种植物基因组DNA电泳结果。
起始量:100mg叶片,100μl洗脱,3μl上样,琼脂糖凝胶浓度为1%,6V/cm,电泳20min,marker为λDNA/Hind III
1:大豆新鲜幼嫩叶片;
2:烟草新鲜幼嫩叶片;
3:小麦新鲜幼嫩叶片;
4:玉米新鲜幼嫩叶片;

试剂盒组成:
组分50T200T
缓冲液FP125ml100ml
缓冲液FP210ml40ml
洗脱缓冲液TE15ml60ml
RNase A(10mg/ml)300μl1.25ml

保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。

注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.缓冲液FP1可能会发黄,并不影响提取效果。
3.若缓冲液FP1或FP2有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用。
4.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。

使用方法:
以下操作步骤为处理100mg新鲜组织或20 mg干重组织时不同溶液的用量,如处理更多量组织,可等比例放大不同溶液的用量。

1.处理材料:
  取植物新鲜组织100mg或干重组织20 mg,加入液氮充分碾磨。
  植物液氮研磨图例
  加入400μl缓冲液FP1和6 μl的RNase A(10 mg/ml),旋涡振荡1 min,室温放置10min。
  注意:由于植物材料多样性非常丰富,所取实验材料的最适量需根据材料的不同,或相同材料的不同组织等进行摸索。
2.加入130 μl缓冲液FP2,充分混匀,涡旋振荡1 min。
3.12000rpm (~13400×g )离心5 min,将上清转移至新的离心管中。
4.可选步骤:将上清液再次12000rpm (~13400×g )离心5 min,将上清转移至新的离心管中。
  注意:此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质,使提取基因组DNA纯度更高。
5.向上清液中加入0.7倍体积的异丙醇,充分混匀,此时会出现絮状基因组DNA。(例如500 μl的上清液加350 μl异丙醇),12000rpm(~13400×g )离心2 min,弃上清,保留沉淀。
6.加入600 μl 70%乙醇,涡旋振荡5 sec,12000rpm(~13400×g )离心2 min,弃上清。
7.重复步骤6。
8.开盖倒置,室温5-10min,彻底晾干残余的乙醇。
  注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
9.加入适量洗脱缓冲液TE,65℃水浴10-60 min溶解DNA,其间颠倒混匀数次助溶,最终得到DNA溶液。

DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
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